一、公司简介 Reichert总部位于美国布法罗市,是一家极其卓绝并创新性的高科技企业。具有170余年研 发、设计及生产高级 光学仪器及分析仪器的历史与经验,并在过去20年里给生命科学和药物 研发等领域用户提供灵敏和稳健的 表面等离子体(Surface Plasmon Resonance, SPR)仪 器。仅在过去10年,采用Reichert公司SPR技术发表的高质 量文献多达数百篇。Reichert生命科 学业务部将继续研发并生产灵敏准确、性价比高的SPR系统,使研究 者可以探索并超越 分子间相互作用非标记检测的极限。
Reichert总部位于美国纽约州布法罗市
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图1.Reichert SPR技术获取数据信息
应用领域 - 浓度测定:可测定生物活性分子(蛋白、抗体、细胞因子、生物标志物等)及(小分子化合物、农药残留、毒素等)准确浓度
- 是否结合(Yes/No):可快速判断分子间是否存在结合
- 亲和力测定(KD):可准确测定分子间从mM到pM范围亲和力
- 动力学测定(KD, Ka, Kd) :通过实时动力学方式提供分子间结合快慢信息,除了提供亲和力信息外,还可呈现结合常数和解离常数
- 热动力学分析( △H,△S):热动力学分析可提供分子间结合深层次机理,判断焓驱动或熵驱动结合,有助于药物创新设计
应用类型 - 蛋白-蛋白/核酸/糖/脂/小分子相互作用
- 完整细胞-分子相互作用
- 抗体-抗原相互作用
- 抗体筛选,表位筛选
- 疫苗、纳米材料、聚合物
- 脂质体(Liposome)、外泌体(exosomes)、病毒、病毒样颗粒(VLPs)
- 热动力学分析 (△H & △S)
- 活性浓度分析
样品类型 - 常规样品:如蛋白、核酸、小分子、细胞上清、细胞裂解液上清等
- 完整细胞:可研究蛋白与完整原核及真核细胞、以及膜性成分(包括细胞膜)之间相互作用
- 血液:直接检测血液样品,减少处理步骤,排除纯化过程对样品的影响
- 细胞裂解液、噬菌体、胶体金颗粒、纳米材料等
应用案例
图2. 大分子相互作用(HSA与anti-HSA相互 图3. 小分子相互作用(CAII与95Da小分 作用) 子Methanesulfonamide相互作用) kon=1.77×105M-1s-1,koff=1.17×10-3s-1, kon = 3.92 ×102 M-1s-1,
KD=6.62nM koff = 2.56×10-1 s-1,KD = 652 μM
图4. SPR-荧光显微镜联用(HEK细胞与纤维 图5. DNA( T-bulge)与锌指复合物相互作用 原蛋白相互作用) kon=4.68×103M-1s-1, kon1 = 2.4 ×103 M-1s-1,koff1 = 8.5×10-3 s-1, koff=1.7×10-1s-1,
KD1 = 3.54 μM;kon2 = 9.7×103 M-1s-1, KD=36.4μM koff2 = 2.5×10-4 s-1,KD2 = 26.4 nM
图6. 植物蛋白相互作用(植物蛋白TWD1 图7. 酶抑制剂的热动力学研究(4-CBS与 与生长素转运抑制剂NPA相互作用) CAII在20℃(蓝线)及35℃(红线)结合
KD=105μM 的温度依赖信号曲线,ΔH为-6.0kcal/mol 。
图8. 纳米颗粒相互作用(纳米金颗粒修 图9. 纳米颗粒相互作用(AP1修饰的
饰的多肽与其抗体相互作用) 纳米笼状颗粒与IL-4的相互作用)
kon=6.9×106M-1s-1 kon=5.25×105M-1s-1 koff=1.55×10-4s-1,
KD=0.30nM
图10. SPR-电化学联用(电压对标 图11. 化学溶液研究(CaCl2溶液对羧甲基
记的短肽与链霉亲和素相互作用的影响) 纤维素吸附的影响)
图12A. 细菌相互作用(通过细菌特异 图12B. 细菌相互作用(分析菌落生长数)
性抗体捕获细菌)
直观易用的软件
- 数据分析处理:动力学分析曲线拟合至少5种模型可选:1:1model,1:2model,2:1model, mass transport model,2-state model等
- 数据分析可采用结合速率或结合信号,实验数据也可直接导入其他专业数据分析软件如Scrubber,Clamp,TraceDrawer等,分析结果支持多种输出格式,Excel,JEPG等
- 数据采集和显示:数据采集软件可用于实验方法创建、保存和运行,并能自动化控制检测模块、进样器、注射泵等,可自行计算非常规溶剂或现行缓冲液的温度系数,精确控制样品仓温度和样品检测温度,实现长时间无人值守自动化检测,按照实验要求完成热动力学检测等,检测过程中实时显示所有步骤曲线
- 支持监管法规环境,符合GxP和21 CFR Part 11
种类丰富的各种芯片 - 传感器芯片:≥12种,包括裸金芯片、固定化ligand芯片、固定脂质体的芯片、捕获细胞的芯片、特殊的捕获芯片以及客户自定义芯片
- 具有捕获标记的SA芯片和对应试剂盒
- 捕获带His标签蛋白的NTA芯片
- 具有捕获细胞的芯片
灵敏度高,数据可靠 ReichertSPR可为药物研究、药物发现、抗体筛选、蛋白结构/功能、基因调控及系统生物学研究等提供至关重要的定量信息,可提供如下高质量、高可信度数据:
- 严谨的动力学分析,结合速率/解离速率-影响治疗性候选分子适用性及剂量的生物学学位重要指标。
- 亲和力范围从极弱到(1mM到1pM)。使得研究细微和强效生物学通路以及更多疗法选择成为可能。
- 极低的噪音和基线漂移,噪音水平0.05μRIU(RMS),基线漂移0.1μRIU/分钟。
可选择升级特殊流路,拓展应用 - 默认配置标准流路,可满足从小分子到细胞在内的大多数应用
- 采用Reichert SPR具有的特殊流路拓展应用能力:电化学流路、石英窗流路(可引入第二光源),在检测SPR数据的同时研究兴趣分子光化学变化或荧光属性(兼容光学显微镜)、质谱流路(用于鉴定结合到芯片表面的分子)。
应用 - 电化学流路:流路中兴趣分子可引发芯片表面的电化学变化,记录SPR信号数据的同时进行SPR/电流分析、SPR/脉冲伏安法、SPR/循环伏安法,并可检测聚合物的形成和其他新的应用
- 光化学/荧光流路:引入第二光源,在检测SPR数据的同时研究兴趣分子光化学变化或荧光属性(兼容荧光显微镜)
- 质谱流路(SPR-MS):用于鉴定结合到芯片表面的兴趣分子